Kapsul Kalsitriol berisi larutan kalsitriol dalam minyak yang sesuai, mengandung kalsitriol, C27H44O3, tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket. [Catatan Pada larutan dapat terjadi isomerisasi yang reversibel menjadi pre-kalsitriol yang dipengaruhi suhu dan waktu. aktivitas obat berasal dari kedua komponen]
Baku pembanding Kalsitriol BPFI; tidak boleh dikeringkan, simpan dalam wadah tertutup rapat, terlindung cahaya, dalam lemari pembeku. Setelah dibuka, simpan bagian yang tidak digunakan di bawah gas inert dalam lemari pembeku.
Identifikasi Waktu retensi puncak utama pada kromatogram Larutan uji sesuai dengan Larutan baku seperti diperoleh pada Penetapan kadar.
Penetapan kadar Lakukan penetapan dengan cara Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera pada Kromatografi <931>.
Fase gerak Buat campuran etil asetat P – heksana P – metanol P – n-propanol P (60:40:2:1). saring dan awaudarakan. Jika perlu lakukan penyesuaian menurut Kesesuaian sistem seperti tertera pada Kromatografi <931>.
Larutan baku Timbang saksama sejumlah Kalsitriol BPFI, masukkan ke dalam labu tentukur yang sesuai, larutkan dan encerkan dengan Fase gerak hingga kadar lebih kurang 1,5 µg per mL. [Catatan Kadar Larutan baku disesuaikan dengan kadar Larutan uji].
Larutan uji Timbang saksama tidak kurang dari 20 kapsul. Keluarkan semua isi kapsul, bersihkan cangkang kapsul dan timbang saksama. Hitung bobot rata-rata isi kapsul.
Untuk kapsul 0,25 µg per kapsul atau kurang Gunakan isi kapsul tanpa pengenceran.
Untuk kapsul lebih dari 0,25 µg Encerkan isi kapsul dengan Fase gerak hingga kadar lebih kurang 1,5 µg per mL.
Sistem kromatografi Kromatograf cair kinerja tinggi dilengkapi dengan detektor 265 nmdan kolom 4,6 mm x 25 cm berisi bahan pengisi L3 dengan ukuran partikel 5 mm. Laju alir lebih kurang 1,2 mL per menit. Lakukan kromatografi terhadap Larutan uji, rekam respons puncak seperti tertera pada Prosedur: respons puncak antara kalsitriol dan respons puncak minyak pembawa terpisah baik.
Prosedur Suntikkan secara terpisah sejumlah volume sama (lebih kurang 20 µL) Larutan baku dan Larutan uji ke dalam kromatograf, rekam kromatogram dan ukur respons puncak kalsitriol dan pre-kalsitriol. Hitung persentase kalsitriol, C27H44O3 dalam kapsul dengan rumus:
rU dan rS berturut-turut adalah jumlah respons puncak kalsitriol dan pre-kalsitriol dalam Larutan uji dan Larutan baku; CS adalah kadar Kasitriol BPFI dalam µg per mL Larutan baku; CU adalah kadar kalsitriol dalam mg per mL Larutan uji berdasarkan jumlah yang tertera pada etiket.
Wadah dan penyimpanan Dalam wadah tertutup rapat, tidak tembus cahaya.