Tambahan Monografi
KAPSUL MEKOBALAMIN
Mecobalamin Capsules

Kapsul Mekobalamin mengandung mekobalamin, C₆₃H₉₁CoN₁₃O₁₄P, tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket.

Baku pembanding Mekobalamin BPFI

Identifikasi

1. Waktu retensi puncak utama kromatogram Larutan uji sesuai dengan Larutan baku seperti yang diperoleh pada Penetapan Kadar.
2. Spektrum serapan ultraviolet larutan 50 µg per mL dalam air pada daerah panjang gelombang antara 220 nm dan 550 nm menunjukkan maksimum dan minimum pada panjang gelombang yang sama seperti pada Mekobalamin BPFI. Kedua spektrum menunjukkan 3 panjang gelombang maksimum pada 266 nm, 342 nm dan 522 nm. [Catatan Lindungi larutan dari cahaya selama pengujian].

Disolusi <1231>

Media disolusi : 500 mL air
Alat tipe 2 : 50 rpm
Waktu : 30 menit.

Larutan baku Timbang saksama sejumlah Mekobalamin BPFI, larutkan dan encerkan dengan air hingga diperoleh kadar 1 µg per mL.

Larutan uji Gunakan alikot yang telah disaring.

Prosedur Lakukan penetapan jumlah mekobalamin, C₆₃H₉₁CoN₁₃O₁₄P yang terlarut dengan cara Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera pada Penetapan kadar.

Toleransi Dalam waktu 30 menit harus larut tidak kurang dari 75% (Q), C₆₃H₉₁CoN₁₃O₁₄P, dari jumlah yang tertera pada etiket.

Keseragaman sediaan <911> Memenuhi syarat. Masukkan isi satu kapsul ke dalam labu tentukur 10- mL, bilas cangkang kapsul beberapa kali dengan Fase gerak, masukkan bilasan ke dalam labu tentukur yang sama. Sonikasi untuk melarutkan, encerkan dengan Fase gerak sampai tanda. Lakukan penetapan dengan cara Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera pada Penetapan kadar.

Syarat lain Memenuhi syarat seperti tertera pada Kapsul.

Cemaran organik Lakukan penetapan dengan cara Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera pada Kromatografi <931>. [Catatan Lindungi larutan dari cahaya selama pengujian].

Fase gerak dan Sistem kromatografi Lakukan seperti tertera pada Penetapan kadar.

Larutan uji Timbang saksama tidak kurang dari 25 kapsul, keluarkan isi semua kapsul dan campur. Timbang saksama isi kapsul setara lebih kurang 5 mg mekobalamin, masukkan dalam labu tentukur 10-mL, tambahkan sejumlah Fase gerak, sonikasi untuk melarutkan dan encerkan dengan Fase gerak sampai tanda, saring, gunakan filtrat.

Larutan pembanding Pipet 1 mL Larutan uji ke dalam labu tentukur 100-mL, encerkan dengan Fase gerak sampai tanda.

Prosedur Suntikkan secara terpisah sejumlah volume sama (lebih kurang 20 μL) Larutan pembanding dan Larutan uji ke dalam kromatograf, rekam kromatogram selama tidak kurang tiga kali waktu retensi puncak utama, dan ukur semua respons puncak: respons puncak masing-masing cemaran pada kromatogram Larutan uji tidak lebih dari respons puncak utama kromatogram Larutan pembanding dan total cemaran pada kromatogram Larutan uji tidak lebih dari tiga kali respons puncak utama kromatogram Larutan pembanding.

Penetapan kadar Lakukan penetapan secara Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera pada Kromatografi <931>. [Catatan Lindungi larutan dari cahaya selama pengujian.]

Dapar Larutan kalium dihidrogen fosfat 0,2 M . Atur pH sampai 4,5 dengan penambahan natrium hidroksida 0,2 N atau asam ortofosfat P.

Fase gerak Campuran Dapar - asetonitril P (84:16). Saring dan awaudarakan. Jika perlu lakukan penyesuaian menurut Kesesuaian sistem seperti tertera pada Kromatografi <931>.

Larutan baku Timbang saksama sejumlah Mekobalamin BPFI larutkan dan encerkan dengan Fase gerak hingga kadar lebih kurang 50 µg per mL.

Larutan uji Timbang saksama tidak kurang dari 25 kapsul, keluarkan isi semua kapsul dan campur, bersihkan cangkang kapsul dan timbang saksama, hitung bobot rata-rata isi tiap kapsul. Timbang saksama  sejumlah   isi     kapsul    setara 5 mg mekobalamin, masukkan ke dalam labu tentukur 100-mL, tambahkan sejumlah Fase gerak, sonikasi untuk melarutkan, dinginkan dan encerkan dengan Fase gerak sampai tanda.

Larutan kesesuaian sistem Timbang 10 mg Mekobalamin BPFI, masukkan ke dalam labu tentukur 20-mL, larutkan dan encerkan dengan air sampai tanda, biarkan terpapar cahaya selama 5-10 menit. Larutan mengandung hidroksokobalamin.

Sistem kromatografi Kromatograf cair kinerja tinggi dilengkapi dengan detektor 342 nm dan kolom 4,6 mm x 25 cm berisi bahan pengisi L1, dengan ukuran partikel 5 μm. Lakukan kromatografi terhadap Larutan kesesuaian sistem, rekam kromatogram dan ukur respons puncak seperti tertera pada Prosedur: resolusi, R, antara mekobalamin dan hidroksokobalamin tidak kurang dari 20 dan simpangan baku relatif pada penyuntikan ulang tidak lebih dari 2,0%. [Catatan Waktu retensi mekobalamin lebih kurang 12 menit, waktu retensi relatif hidroksokobalamin lebih kurang 0,2.]

Prosedur Suntikkan secara terpisah sejumlah volume sama (lebih kurang 20 μL) Larutan baku dan Larutan uji ke dalam kromatograf, rekam kromatogram dan ukur respons puncak utama. Hitung persentase mekobalamin,C₆₃H₉₁CoN₁₃O₁₄P, dalam kapsul dengan rumus:

r_U dan r_S berturut-turut adalah respons puncak mekobalamin dari Larutan uji dan Larutan baku; C_S adalah kadar Mekobalamin BPFI dalam µg per mL Larutan baku; C_U adalah kadar mekobalamin dalam µg per mL Larutan uji berdasarkan jumlah yang tertera pada etiket.

Wadah dan penyimpanan Dalam wadah tertutup rapat, terlindung dari cahaya.