Ursodeoxycholic Acid Capsules

Kapsul asam ursodeoksikolat mengandung asam ursodeoksikolat, C₂₄H₄₀O₄, tidak kurang dari 95,0% dan tidak lebih dari 105,0% dari jumlah yang tertera pada etiket.

Baku pembanding Asam Ursodeoksikolat BPFI; Simpan dalam wadah tertutup rapat, di tempat dingin, dengan ventilasi baik. Lakukan pengerjaan di tempat kering Asam Senodeoksikolat BPFI (cemaran A). Cemaran Asam Ursodeoksikolat BPFI (mengandung asam senodeoksikolat dan asam 7-ketolitokolat).

Identifikasi

    A. Ekstraksi sejumlah isi kapsul setara dengan            0,1 g asam ursodeoksikolat dengan 10 mL etanol P, sentrifus, dan uapkan beningan hingga kering                di bawah aliran nitrogen dalam tangas air pada suhu ruang dan keringkan residu dengan tekanan 5 mmHg selama 2 jam: Spektrum serapan inframerah residu yang didispersikan dalam Kalium bromida P menunjukkan maksimum hanya pada bilangan gelombang yang sama seperti pada Asam Ursodeoksikolat BPFI.

    B. Waktu retensi puncak utama kromatogram Larutan uji sesuai dengan Larutan baku seperti yang diperoleh pada Penetapan kadar.

Disolusi <1231>

    Media disolusi: 900 mL Dapar fosfat pH 7,5 yang dibuat sebagai berikut: Buat campuran kalium dihidrogen fosfat 0,05 N-dinatrium hidrogen fosfat 0,05 N (1:1). Atur pH hingga 7,5 dengan penambahan natrium hidroksida 1 N.

    Alat tipe 2: 75 rpm.

    Waktu: 45 menit.

Lakukan penetapan persentase asam ursodeoksikolat, C₂₄H₄₀O₄, yang terlarut dengan cara Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera pada Kromatografi <931>. Sistem Kromatografi Lakukan seperti tertera pada Penetapan kadar.

    Larutan uji Saring sejumlah alikot dan jika perlu encerkan dengan Media disolusi hingga diperoleh kadar larutan setara dengan asam ursodeoksikolat 0,028%.

    Larutan baku Timbang saksama lebih kurang 28 mg Asam Ursodeoksikolat BPFI,masukkan ke dalam labu tentukur 100-mL, tambahkan 0,7 mL natrium hidroksida 0,1 N, encerkan dengan Media disolusi sampai tanda, sonikasi selama 20 menit dan dinginkan hingga suhu ruang.

    Prosedur Suntikkan secara terpisah sejumlah volume sama (lebih kurang 250 mL) Larutan baku dan Larutan uji ke dalam kromatograf, rekam kromatogram, dan ukur respons puncak.

    Toleransi Dalam waktu 45 menit harus larut tidak kurang dari 70%, asam ursodeoksikolat, C₂₄H₄₀O₄, dari jumlah yang tertera pada etiket.

Cemaran organik Lakukan penetapan dengan cara Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera pada Kromatografi <931>.

    Larutan A Timbang saksama lebih kurang 800 mg natrium dihidrogen fosat dihidrat P, larutkan dan encerkan dalam 1 L air, atur pH hingga 3,0 dengan penambahan asam fosfat P.

    Fase gerak Campuran asetonitril P-metanol P-Larutan A (25:34:47). Saring dan awaudarakan. Jika perlu lakukan penyesuaian menurut Kesesuaian sistem seperti tertera pada Kromatografi <931>. 

    Pelarut Campuran metanol P-Fase gerak (20:80).

    Larutan uji persediaan Timbang saksama sejumlah isi kapsul setara dengan 250 mg asam ursodeoksikolat, larutkan dengan 15 mL Pelarut A dan sonikasi selama 15 menit. Encerkan hingga 50 mL dan saring menggunakan penyaring PVDF dengan porositas 0,45 µm atau yang setara.

    Larutan uji Pipet 1 mL Larutan uji persediaan, masukkan ke dalam labu tentukur 200-mL, encerkan dengan Pelarut A sampai tanda.

    Enceran larutan uji Pipet 1 mL Larutan uji, masukkan ke dalam labu tentukur 10-mL, encerkan dengan Pelarut sampai tanda.

    Larutan baku Timbang saksama setotal cemaran Asam Ursodeoksikolat BPFI dan Asam Senodeoksikolat BPFI, larutkan, dan encerkan dengan Pelarut hingga kadar berturut-turut lebih kurang 0,5%  dan 0,0055%.

    Sistem Kromatografi Kromatograf cair kinerja tinggi dilengkapi dengan detektor refraksi                indeks dan kolom 2,1 mm x 10 cm berisi bahan pengisi L1 dengan ukuran partikel 3 µm. Pertahankan suhu kolom pada 40º. Laju alir lebih kurang 0,6 mL per menit. Lakukan kromatografi terhadap Larutan baku, rekam kromatogram, dan ukur respons puncak seperti tertera pada Prosedur: resolusi, R, antara puncak asam ursodeoksikolat dan asam 7-ketolitokolat tidak kurang dari 2,0; waktu retensi relatif asam ursodeoksikolat lebih kurang 5 menit.

    Prosedur Suntikkan secara terpisah sejumlah volume sama (lebih kurang 8 mL) Larutan uji persediaan, Larutan uji, dan Enceran larutan uji ke dalam kromatograf, rekam kromatogram 5 kali waktu retensi asam ursodeoksikolat dan ukur semua respons puncak. Masing-masing cemaran dan total cemaran tidak lebih dari batas yang tertera pada Tabel.

Tabel

Abaikan cemaran dengan puncak kurang dari luas puncak utama Enceran larutan uji (0,05%).

Penetapan kadar Lakukan penetapan dengan cara Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera pada Kromatografi <931>.

    Fase gerak Buat campuran asetonitril P-kalium dihidrogen fosfat 0,001 M (40:60). Biarkan mencapai kesetimbangan pada suhu ruang, atur pH hingga 2,0 dengan penambahan asam fosfat 85%, dan saring.

    Larutan uji Timbang saksama tidak kurang dari     20 kapsul. Keluarkan semua isi kapsul, bersihkan cangkang kapsul, dan timbang saksama. Hitung bobot rata-rata isi kapsul. Timbang saksama sejumlah isi kapsul setara dengan 125 mg asam ursodeoksikolat, masukkan ke dalam labu tentukur 50-mL, larutkan dengan 15 mL metanol P dan sonikasi selama 10 menit. Encerkan dengan Fase gerak sampai tanda.

    Larutan baku Timbang saksama lebih kurang                  50 mg Asam Ursodeoksikolat BPFI, masukkan ke dalam labu tentukur 20-mL. Tambahkan 2 mL metanol P, dan sonikasi selama 10 menit. Encerkan dengan Fase gerak sampai tanda.

    Sistem Kromatografi Kromatograf cair kinerja tinggi dilengkapi dengan detektor 210 nm                       dan kolom 4,6 mm x 25 cm berisi bahan pengisi L1  dengan ukuran partikel 4 µm. Pertahankan                  suhu kolom pada 40º. Laju alir lebih kurang                    1,5 mL per menit.

    Prosedur Suntikkan secara terpisah sejumlah volume sama (lebih kurang 30 mL) Larutan baku  dan Larutan uji ke dalam kromatograf, rekam kromatogram, dan ukur respons puncak. Hitung persentase, asam ursodeoksikolat, C₂₄H₄₀O_4, dalam kapsul dengan rumus:

r_U dan r_S berturut-turut adala respons puncak asam ursodeoksikolat dari Larutan uji dan Larutan baku. C_S adalah kadar Asam Ursodeoksikolat BPFI dalam mg per mL Larutan baku; C_U adalah kadar zat dalam mg per mL Larutan uji berdasarkan jumlah yang tertera pada etiket.

Wadah dan penyimpanan Dalam wadah tertutup rapat.