Clozapine

8-Kloro-11-(4-metil-1-piperazinil)-5H-dibenzol[b,e][1,4]diazepin [5786-21-0].

C₁₈H₁₉ClN₄                                                                           BM 326,82

Klozapin mengandung, C₁₈H₁₉ClN₄, tidak kurang dari 98,0% dan tidak lebih dari 102,0%, dihitung terhadap zat kering.

Pemerian Serbuk hablur; kuning.

Kelarutan Tidak larut dalam air; larut dalam kloroform, dalam aseton, dan dalam etanol; sukar larut dalam asetonitril.

Baku pembanding Klozapin BPFI; tidak boleh dikeringkan. Simpan dalam wadah tertutup rapat. Campuran Resolusi Klozapin BPFI, mengandung komponen berikut: Klozapin, Cemaran A, Cemaran B, Cemaran C, dan Cemaran D.

Identifikasi

    A. Spektrum serapan inframerah zat yang didispersikan dalam kalium bromida P, menunjukkan maksimum hanya pada bilangan gelombang yang sama seperti pada Klozapin BPFI.

    B. Waktu retensi puncak utama kromatogram Larutan uji sesuai dengan Larutan baku seperti yang diperoleh pada Penetapan kadar.

Susut pengeringan <1121> Tidak lebih dari 0,5%; lakukan pengeringan pada suhu 105° selama 4 jam.

Sisa pemijaran <301> Tidak lebih dari 0,1%.

Logam berat <371> Metode III Tidak lebih dari 20 bpj.

Cemaran organik Lakukan penetapan dengan cara Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera pada Kromatografi <931>.

    Pengencer Campuran metanol P - air (4:1).

    Dapar Buat larutan kalium fosfat monobasa P 2,0 g per L, atur pH hingga 2,4 dengan penambahan asam fosfat P (85%). [Catatan pH larutan harus di bawah 2,4].

    Fase gerak Gunakan variasi campuran Larutan A dan Larutan B seperti tertera pada Sistem kromatografi. Jika perlu lakukan penyesuaian menurut Kesesuaian sistem seperti tertera pada Kromatografi <931>.

    Larutan A Buat campuran asetonitril P – metanol P – Dapar (1:1:8), saring dan awaudarakan.

    Larutan B Buat campuran asetonitril P – metanol P -  Dapar (2:2:1), Saring dan awaudarakan.

    Larutan kesesuaian sistem Timbang saksama lebih kurang 4 mg Campuran Resolusi Klozapin BPFI, masukkan ke dalam labu tentukur 10-mL. Larutkan dalam 4 mL metanol P, tambahkan 1 mL air, dan encerkan dengan Pengencer sampai tanda.

    Larutan baku Timbang saksama sejumlah Klozapin BPFI, larutkan, dan encerkan dengan Pengencer hingga kadar lebih kurang 0,75 µg per mL.

    Larutan uji Timbang saksama sejumlah zat, masukkan ke dalam labu tentukur yang sesuai. Larutkan dalam metanol P sebanyak 80% volume labu, encerkan dengan air sampai tanda. Kadar larutan lebih kurang 0,75 mg per mL.

    Sistem kromatografi Kromatograf cair kinerja tinggi dilengkapi dengan detektor 257 nm dan kolom 4,6 mm x 15 cm yang berisi bahan pengisi L1 dengan ukuran partikel 5 µm. Laju alir lebih kurang 1,2 mL per menit. Kromatograf diprogram sebagai berikut:

Lakukan kromatografi terhadap Larutan kesesuaian sistem, rekam kromatogram, dan ukur respons puncak seperti tertera pada Prosedur: resolusi, R, puncak cemaran C dan klozapin tidak kurang dari 2,5. Lakukan kromatografi terhadap Larutan baku, rekam kromatogram, dan ukur respons puncak seperti tertera pada Prosedur: simpangan baku relatif pada penyuntikan ulang tidak lebih dari 5,0% untuk klozapin. [Catatan waktu retensi relatif tertera pada Tabel].

Prosedur Suntikkan secara terpisah sejumlah volume sama (lebih kurang 20 µL) Larutan baku dan Larutan uji ke dalam kromatograf, rekam kromatogram dan ukur semua respons puncak. [Catatan Abaikan puncak dengan luas kurang dari 0,5 kali luas puncak klozapin dari larutan baku]. Hitung persentase masing-masing senyawa sejenis dan cemaran lain dalam zat, dengan rumus:

r_i adalah respons puncak masing-masing cemaran dalam Larutan uji; r_S  adalah respons puncak klozapin dalam Larutan baku; C_S adalah kadar Klozapin BPFI dalam mg per mL Larutan baku; C_U adalah kadar klozapin dalam mg per mL Larutan uji berdasarkan bobot yang ditimbang; dan F adalah faktor respons relatif seperti tertera pada Tabel. Masing-masing cemaran dan total cemaran tidak lebih dari batas yang tertera pada Tabel sebagai berikut:

Tabel

Penetapan kadar Lakukan penetapan dengan cara Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera pada Kromatografi <931>.

    Fase gerak Buat campuran metanol P – trietilamin P - air (800:0,75:200).

    Pengencer Campuran metanol P- air (4:1).

    Larutan baku Timbang saksama sejumlah Klozapin BPFI, larutkan, dan encerkan dengan Pengencer hingga kadar lebih kurang 0,1 mg per mL.

Larutan kesesuaian sistem persediaan Timbang 10 mg Klozapin BPFI, masukkan ke dalam wadah yang sesuai, tambahkan 5 mL asam hidroklorida 0,1 N, dan panaskan selama 2 jam pada suhu 90^o. Pindahkan larutan ke dalam labu tentukur 100-mL, tambahkan 15 mL air, dan encerkan dengan metanol P sampai tanda. 

    Larutan kesesuaian sistem Campuran Larutan baku - Larutan kesesuaian sistem persediaan (1:1).

    Larutan uji Timbang saksama sejumlah zat, larutkan dan encerkan dengan Pengencer hingga kadar lebih kurang 0,1 mg per mL.

    Sistem kromatografi Kromatograf cair kinerja tinggi dilengkapi dengan detektor 257 nm dan kolom 4,6 mm x 25 cm, berisi bahan pengisi L7 dengan ukuran partikel 5 µm. Laju alir lebih kurang 1 mL per menit. Lakukan kromatografi terhadap Larutan kesesuaian sistem. Rekam kromatogram dan ukur respons puncak seperti tertera pada Prosedur: resolusi, R, antara puncak klozapin dan puncak lainnya tidak kurang dari 1,5. Lakukan kromatografi terhadap Larutan baku. Rekam kromatogram dan ukur respons puncak seperti tertera pada Prosedur: faktor ikutan puncak analit tidak lebih dari 1,5 dan simpangan baku relatif pada penyuntikan ulang tidak lebih dari 1,0%.

Prosedur Suntikkan secara terpisah sejumlah volume sama (lebih kurang 10 µL) Larutan baku dan Larutan uji ke dalam kromatograf, rekam kromatogram hingga 3 kali waktu retensi puncak klozapin. Hitung persentase klozapin, C₁₈H₁₉ClN₄, dalam zat dengan rumus:

r_U  dan r_S berturut-turut adalah respons puncak Larutan uji dan Larutan baku; C_S adalah kadar Klozapin BPFI dalam mg per mL Larutan baku dan C_U adalah kadar klozapin dalam mg per mL Larutan uji berdasarkan bobot yang ditimbang.

Wadah dan penyimpanan Dalam wadah tertutup baik.